Ki jan aparèy chofaj PTFE fè nan faz mobil korozif chofaj pou HPLC?

Asid trifluoroacetic, tanpon fosfat ak iyon -reyaktif pè yo souvan itilize kòm faz mobil nan kromatografi likid segondè. Pre-chofaj faz mobil lan anvan ou antre nan kolòn nan amelyore separasyon an, sepandan aparèy chofaj la ta dwe chimikman inaktif pou evite pik fantom oswa derive debaz. Tout konpozan mouye nan chemen koule nan sistèm HPLC aktyèl yo dwe evalye pou potansyèl pou yo lage ekstrè oswa kominike avèk analit.

Nesesite pou prechofe faz mobil nan HPLC
Prechofaj faz mobil se yon operasyon komen nan kwomatografi likid anba kondisyon tanperati ogmante (anjeneral 30-80 degre). Prechofaj garanti ke eluyan an antre nan antre kolòn nan yon tanperati konstan, byen defini epi li amelyore:

Retansyon tan repete

Simetri ak fòm pik

Sinetik transfè mas, patikilyèman pou gwo biomolekil oswa faz mobil gluan

Efikasite kolòn (plak)

Lè yon faz frèt mobil antre nan yon kolòn chofe san yo pa prechofaj, gradyan tèmik yo pwodui sou kabann nan kolòn. Sa a rezilta nan elaji gwoup, pik defòme ak pèfòmans separasyon inegal. Prechofaj la anjeneral sitiye dirèkteman apre ponp lan ak anvan injektè a oswa kolòn inlet, anplwaye yon longè tib etwat -foraj oswa yon ti echanjeur chalè.

Eleman Prechofaj metalik Risk Kontaminasyon
Faz mobil korozivite yo lajman itilize nan-faz ranvèse, echanj iyon- ak chromatografi entèraksyon idrofil (HILIC). Adisyon agresif tipik yo se:

0.05-0.1% (v/v) asid trifluoroacetic (TFA)

Asid asid oswa asid fòmik.

Tanpon fosfat (pH 2-3 ak 7-8)

Asid pèklorik oswa sulfat ki gen tanpon

Ion -reyaktif kouple, tankou fosfat tetrabutilamonyòm oswa asid eptansulfonik

Alkaline mobile phase (pH>9) ak idroksid amonyòm oswa tanpon kabonat.

Si yo itilize yon prechofaj metalik (egzanp Nerjaveèi 316), pwodui chimik korozif sa yo ka pwogresivman lesiye iyon metal -sitou fè, chromium ak nikèl-nan faz mobil la. Pousantaj lesivaj ogmante pa pi wo tanperati ak asid oswa alogen-ki gen eluyan. Konsekans analiz HPLC yo grav:

Pik fantom - Iyon metal yo ka konbine avèk pwodui chimik chelatant ki prezan nan echantiyon an oswa faz mobil epi elite kòm pik inatandi.

Derivasyon debaz - Kreyasyon pwogresif-nan siyal background ki asosye ak metal, sitou nan UV oswa deteksyon konduktivite.

Pik tailing oswa pèt - Analit ki sansib a metal (egzanp, peptides fosforilate, organofosfat, katekolamin, oswa molekil ki gen gwoup karboksil) ka adsorbe sou sifas metal oswa presipite kòm sèl metal.

Degradasyon kolòn - Iyon metal ki lesiye ka depoze sou faz estasyonè a, sa ki afekte selektivite ak tan lavi kolòn nan.

Ki jan aparèy chofaj PTFE ka simonte pwoblèm nan prechofaj faz mobil yo
Yon aparèy chofaj PTFE HPLC aparèy chofaj faz mobil elimine kontak metal nèt. De konfigirasyon komèsyal tipik yo se:

Aparèy chofaj tubulaires PTFE (kalite jakèt)
Bobin prechofaj la se yon longè tib PTFE (anjeneral 0.5-2.0 mm entèn dyamèt, 1-5 mèt longè). Tib la kouvri ak yon levit chofaj fleksib oswa yon aparèy chofaj rezistans entegre nan PTFE. Se tout asanble a izole tèmik. Faz mobil lan kouri nan tib PTFE inaktif la, pran chalè nan miray tib la. Pa gen okenn moso metal yo mouye.

PTFE katouch aparèy chofaj metal -gratis echanjeur chalè
Yo mete yon ti aparèy chofaj katouch, kouvwi ak PTFE, nan yon blòk PTFE machin ak yon kanal koule serpentine. Blòk la chofe inifòm. Faz mobil lan sikile atravè chanèl la. Konsepsyon an bay efikasite transfè chalè amelyore, pi ba volim mouri epi li byen adapte pou aplikasyon UHPLC.

Both setups have the same basic benefit, that the mobile phase is solely in contact with PTFE or suitable fluoropolymers (e.g. PFA, FEP). PTFE is resistant to all popular HPLC solvents such as:

Methanol, asetonitrile, tetrahydrofuran

Dlo ki gen jiska 100% modifye òganik

Aditif asid (pH 0-3): TFA, fòmik, fosfò, asid pèklorik

Aditif debaz (pH 9-12): idroksid amonyòm, trietilamin, kabonat / bikabonat

Reyaktif pè iyon ak sèl tanpon

Pa gen iyon metal yo libere. Anplis de sa, sifas ki pa -baton an evite adsorption nan analit la oswa akimilasyon nan patikil nan prechofaj la.

Karakteristik pèfòmans pou aplikasyon HPLC
Anjeneral, prechofaj faz mobil fèt nan tanperati ki soti nan anbyen jiska 80 degre. Chofaj PTFE fè joliman nan seri sa a san yo pa deformation oswa deteryorasyon chimik. Puissance a minim (anjeneral 20-100 W) paske sèlman yon ti volim faz mobil (0.1-5 mL/min) bezwen chofe. Kontwòl PID kenbe tanperati a nan valè yo bay nan ± 0.5 degre, asire kondisyon tèmik previzib soti nan yon piki nan pwochen an.

Inertness nan yon prechofaj ki baze sou PTFE-pèmèt analis nan devlopman metòd yo sèvi ak faz mobil agresif (ki otreman ta bezwen yon ranplasman regilye nan prechofaj metalik) ak konfyans. Pou analit metal-sansib, yon kanal koule konplètman inaktif - soti nan tèt ponp (tipikman PEEK-aliyen) nan injektè, prechofaj, kolòn ak detektè - se posib. Prechofaj PTFE yo se yon pati enpòtan nan tout-sistèm inaktif sa a.

Plizyè founisè kwomatografi ofri prechofaj faz mobil ki baze sou PTFE{0}}ki aksesib nan komèsyal. Aparèy sa yo anjeneral ekipe ak yon bobin PTFE, yon aparèy chofaj rezistans entegral ak pwoteksyon sou tanperati ak yon pwodiksyon kontwolè pou koneksyon ak yon kanal evènman ekstèn nan yon sistèm HPLC. Gen kèk konsepsyon ki gen yon -tèrmokapteur pou kontwòl bouk fèmen.

Limit ak opozisyon
Chofaj Ptfe travay byen pou pre-chofaj faz mobil men kèk faktè pratik ta dwe konsidere:

Pressure rating - PTFE tubing becomes soft at extreme temperatures. The maximum operating pressure should be reduced. For high pressure applications (e.g. >200 bar), PFA (perfluoroalkoxy) tib se detanzantan chwazi akòz fòs siperyè mekanik nan tanperati.

Konduktivite tèmik. PTFE gen yon konduktiviti tèmik pi ba pase metal. Se poutèt sa, pou akonpli menm pousantaj chofaj la, longè tib ki pi long ak/oswa pi gwo pouvwa aparèy chofaj ka nesesè parapò ak yon prechofaj metalik. Diferans lan se sepandan minè nan pousantaj koule òdinè (0.2-2.0 mL / min).

Tanperati maksimòm - PTFE kòmanse fonn nan tanperati ki pi wo a 200 degre, sepandan HPLC faz mobil pre-chofaj se raman pi lwen pase 80 degre. Pakonsekan, gen yon tanpon sekirite gwo.

Konklizyon: Liy de baz ki pi pwòp ak rezilta HPLC ki pi serye
Lè yo elimine yon sous kontaminasyon nan HPLC, aparèy chofaj PTFE yo kontribye nan liy debaz ki pi pwòp ak rezilta ki pi konsistan. Aparèy chofaj sa yo ofri yon kanal chofaj chimik ki inaktif ak metal-gratis pou faz mobil korozif tankou sa yo ki gen TFA, tanpon fosfat oswa reyaktif iyon -epi fasilite devlopman metòd solid ak analiz woutin san enkyetid yo nan lesivaj metal oswa entèraksyon analit.

Tout sifas ki mouye enstriman analyse yo dwe pwòp. Yon senp konsepsyon inaktif, PTFE aparèy chofaj HPLC faz mobil chofaj teknik adrese yon pwoblèm long -kanpe nan kwomatografi likid kontanporen. Avèk sistèm HPLC k ap kontinye rive jwenn pi gwo sansiblite ak pi ba limit deteksyon (egzanp aplikasyon LC-MS/MS) bezwen an pou konpozan chemen koule metal-gratis ki gen ladan prechofaj faz mobil ap rete kritik.